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巢式pcr产物可以稀释吗(巢式pcr)

2022-10-12 10:54:17 来源: 用户: 

您好,今天帅帅来为大家解答以上的问题。巢式pcr产物可以稀释吗,巢式pcr相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、其优点是:克服了单次扩增平台期效应的限制,使扩增倍数提高,从而极大的提高了PCR的敏感性;2、由于模板和引物的改变,降低了非特异性反应连续放大进行的可能性,保证了反应的特异性;3、内侧引物扩增的模板是外侧引物扩增的产物,第二阶段反应能否进行,也是对第一阶段反应正确性的鉴定,因引可以保证整个反应的准确性及可行性。

2、但其亦有缺点:进行第二次PCR坟增引起交叉污染的几率大。

3、为了克服此缺点,可彩用同一反应管中巢式PCR,主要利用内外引物Tm值不同。

4、如果你已排除引物,酶,RNA提取,逆转录等等其他原因引起的PCR不成功,确定关键原因是模板量低的话,可以用巢式。

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