【生工引物怎么稀释】在分子生物学实验中,引物的正确稀释是保证PCR等实验成功的重要环节。生工生物(Sangon)作为国内知名的引物合成公司,其提供的引物通常以冻干粉形式交付,使用前需根据实验需求进行适当稀释。以下是对“生工引物怎么稀释”的详细说明。
一、引物稀释的基本原则
1. 浓度控制:根据实验类型选择合适的引物浓度,一般建议初始稀释浓度为100 μM。
2. 溶剂选择:推荐使用无核酸酶的水(如DEPC处理水)或TE缓冲液进行稀释。
3. 避免污染:操作过程中应保持无菌环境,防止引物降解或污染。
4. 储存条件:稀释后的引物应分装保存于-20℃,避免反复冻融。
二、生工引物稀释步骤
| 步骤 | 操作内容 |
| 1 | 打开引物管,用移液枪吸取适量的无菌水或TE缓冲液加入到冻干引物中。 |
| 2 | 轻轻混匀,避免剧烈震荡导致引物断裂。 |
| 3 | 根据所需浓度计算稀释体积,例如:若引物为100 μmol,稀释至100 μM,需加入1 mL水。 |
| 4 | 将稀释好的引物分装后置于-20℃冰箱保存。 |
三、常见稀释浓度对照表
| 引物原始浓度(μmol) | 稀释至100 μM所需体积(mL) | 建议用途 |
| 100 | 1 | PCR常规使用 |
| 50 | 0.5 | 高灵敏度实验 |
| 25 | 0.25 | 定量PCR、测序 |
| 10 | 0.1 | 特殊实验或小规模应用 |
四、注意事项
- 若引物溶解不完全,可短暂离心后再次尝试。
- 使用前应检查引物是否已完全溶解,避免出现沉淀。
- 不同实验对引物浓度要求不同,建议根据实验手册调整。
- 稀释后的引物应尽快使用,避免长时间存放影响活性。
通过以上步骤和表格,可以系统地掌握“生工引物怎么稀释”的方法,确保实验顺利进行。合理稀释不仅能提高实验成功率,还能延长引物的使用寿命。


